CARS光谱

非线性拉曼光谱成像是一种执行无标记微观分子成像的有效方法。相干反斯托克斯拉曼散射（CARS）和受激拉曼散射（SRS）是非线性拉曼光谱成像的两种主要技术。

多重CARS显微光谱系统是借助普林斯顿仪器进行搭建如图所示；激光源基于主振荡器光纤放大器（MOFA）配置；波长、时间持续时间和重复率分别为1064nm，85ps和0.82MHz。

激光脉冲被分为两个具有一个部分被用作泵浦辐射（ω₁）以产生SC，另一个被用作斯托克斯辐射（ω₂），用于所述CARS流程。

离轴抛物面镜后SC的光谱分布如图 b通过使用近红外（NIR）光谱仪测量。由于NIR周围的光谱密度应该高，以便有效地产生CARS信号，因此制造PCF以有效地产生1100和1700nm之间的光谱分量。

通过第一物镜将入射激光脉冲紧密聚焦到样品上。将样品置于压电平台上进行显微成像；并使用第二物镜收集CARS信号，并且通过使用光谱仪（LS-785，Princeton Instruments，MA）色散。

最后，通过使用CCD（Blaze 400-HR和用于活细胞成像的PIXIS 100-BR-DD，Princeton Instruments，MA）检测CARS信号。